提供世界一流的高灵敏度、高可靠性的Nano-LC-ESI-MS/MS蛋白质分析鉴定技术。自2003年以来, 我们向世界各地的尖端科学研究机构提供了高质量的全面的蛋白质谱服务。我们的服务质量也已从我们的国内外客户在国际一 流杂志上发表的论文中得到证实。
Label-free MS定量组学分析
1: 由于和代谢或化学标记无关,这个方法可用于任何蛋白质样品,包括原代细胞样品,组织和血液样品。
2:该方法结合三种水平的MS丰度特征(peptide count, spectral count and fragment-ion intensit)来消除重复的MS测量值之间的差异。它能够在相同或者不同样品中重复测定几千种蛋白。
3:根据研究,该方法可以同时准确的检测> 80%蛋白。
步骤:
1:根据样品信息,我们将蛋白按照分子量、电荷、疏水性等性状分成多个组分。常用的分离方法包括SDS-PAGE,SCX等色谱方法。蛋白的分组有利于样品深度的分析和检测到更多蛋白。
2:如果需要进行某一类蛋白组学分析,例如有特定修饰的肽段,我们需要进行标准的亲和纯化,纯化过程包括:Trypsin水解和亲和层析。通常IMAC方法用于纯化磷酸化肽链,抗体经常用来纯化乙酰化或泛素化肽链,能够有针对性的对翻译后修饰的位点进行识别。由于亲和纯化后未经修饰的肽链被去除,翻译后修饰肽链的相对含量能够测出。
3:获得的LCMS数据输入到我们的专有软件程序中进行生物信息学分析。
分析包括:
i). 从MS / MS数据识别肽序列;
ii). 聚集相同的蛋白所有肽序列;
iii).从多个组分中聚集相同蛋白;
iv).计算每个蛋白质的SNI和在原样品中的相对丰度;
v).对于在进行比较的的几组样品中,如果有些蛋白的差异高于设置的标准,会对其进行差异分析来鉴别这些蛋白种类。
优势:
1:ProtTech 十二年质谱检测经验,品质保证;
2:优化了样品处理步骤,最大程度保证蛋白信息的完整性;
3:专有的系统改进技术增加蛋白检测的数量,提高了检测的灵敏度。
4:ProTtech已开发了十几种专有的分析软件,已确保检测结果的准确。
相关文献:
The molecular mechanism of mediation of adsorbed serum proteins to endothelial cells adhesion and growth on biomaterials
D Yang, X Lü, Y Hong, T Xi, D Zhang - Biomaterials, 2013 - Elsevier
... the aim of this study is to systematic investigate the molecular mechanism of mediation ... Protein
samples were desalted by dialysis using membrane with a molecular weight cut off ... by
NanoLC-MS/MS peptide sequencing technology were performed in ProtTech, Inc., (Norristown ...